![Fig. Workflowdiagram van het nano-dLAMP-detectiesysteem. Krediet: SIBET Wetenschappers ontwikkelen chip-gebaseerde digitale PCR-detectietechnologie en instrument](https://scx1.b-cdn.net/csz/news/800a/2021/scientists-develop-chi.jpg)
Fig. Workflowdiagram van het nano-dLAMP-detectiesysteem. Krediet: SIBET
Een gezamenlijk team uit China leverde onlangs een gevoelige, multiplexing, kwantitatieve detectiemethode voor de vroege diagnose en gerichte therapie van myeloproliferatieve neoplasmata, een type chronische hematologische tumor die gepaard gaat met beenmergfalen of leukemie.
Het team, geleid door Zhou Lianqun van het Suzhou Institute of Biomedical Engineering and Technology van de Chinese Academie van Wetenschappen en GUAN Ming van het Huashan Hospital, heeft een door nanodeeltjes ondersteund digitaal lus-gemedieerde isothermische amplificatie (nano-dLAMP) platform opgezet voor de analyse van myeloproliferatieve neoplasmata.
Digitale polymerasekettingreactie (digitale PCR, dPCR), een zeer gevoelige, absolute kwantitatieve en hoogtolerante nucleïnezuurdetectietechnologie, speelt een belangrijke rol in een verscheidenheid aan toepassingsgebieden, zoals detectie van zeldzame mutaties, variatie in kopienummers, vloeibare biopsie , eencellige analyse, genetisch gemodificeerde detectie, testen van virale belasting en microbiologische kwantitatieve analyse.
In deze studie fabriceerden de onderzoekers microarray-chips met vier fysieke partities voor de gelijktijdige detectie van calreticulin type 1, calreticulin type 2, janus kinase 2 V617F-mutaties en een intern referentiegen.
Vervolgens gebruikten ze PCR-additieven en nanodeeltjes om de traditionele lusgemedieerde isotherme amplificatie (LAMP) geschikt te maken voor amplificatie op nanoliterschaal.
Resultaten suggereerden dat nanodeeltjes de amplificatieprestaties van nanoliter LAMP zouden kunnen verbeteren.
Kwantitatieve detectie van de belangrijkste moleculaire markers van myeloproliferatieve neoplasma’s zou binnen een uur gelijktijdig kunnen worden uitgevoerd in één microarray-chip met vier partities. De overeenkomst tussen het ontwikkelde platform en het commerciële Quantstudio 3D was hoog met 99%.
Dit nauwkeurige, snelle, multiplex en goedkope nano-dLAMP-platform zou volgens de onderzoekers in de toekomst een veelbelovend hulpmiddel kunnen zijn voor klinische diagnose.
De resultaten van de studie zijn gepubliceerd in Sensors & Actuators B: Chemical getiteld “Establishment of Scalable Nanoliter Digital LAMP Technology for the Quantitative Detection of Multiple Myeloproliferative neoplasm moleculaire markers.”
De groep van Zhou richt zich al meer dan 10 jaar op het gebied van biosensoren en heeft een stevige basis opgebouwd in de ontwikkeling van biosensormethoden, het ontwerp en de verwerking van biochips en de ontwikkeling van biowetenschappelijke instrumenten.
In het digitale PCR-onderzoek en -ontwikkeling werd een op chips gebaseerde dPCR (cdPCR) -methode met hoge isolatiestabiliteit, goede temperatuuruniformiteit en hoge detectiesnelheid ontwikkeld. Er werd een reeks vooruitgang geboekt met de detectiemethode, chip, reagens en instrument van cdPCR.
Guojun Cao et al, Oprichting van schaalbare nanoliter digitale LAMP-technologie voor de kwantitatieve detectie van moleculaire markers van meerdere myeloproliferatieve neoplasma’s, Sensoren en actuatoren B: Chemisch (2021). DOI: 10.1016/j.snb.2021.130493
Geleverd door de Chinese Academie van Wetenschappen